Nature.com сайтына кіргеніңіз үшін рахмет. Сіз қолданып жатқан шолғыш нұсқасында CSS қолдауы шектеулі. Ең жақсы тәжірибе үшін жаңартылған шолғышты пайдалануды ұсынамыз (немесе Internet Explorer шолғышында үйлесімділік режимін өшіріңіз). Әзірге қолдауды жалғастыру үшін сайтты мәнерлерсіз және JavaScriptсіз көрсетеміз.
Ұялы телефония байланысына үнемі өсіп келе жатқан сұраныс биологиялық жүйелерге әртүрлі әсер етуі мүмкін сымсыз технологиялардың (G) үздіксіз пайда болуына әкелді. Мұны тексеру үшін біз егеуқұйрықтарды 4G ұзақ мерзімді эволюциясының (LTE) -1800 МГц электромагниттік өрісінің (ЭМӨ) бір басы әсерінен 2 сағат бойына әсер еттік. Микроглия кеңістігіндегі жедел нейрондық қабыну және бастапқы есту қыртысының электрофизиологиялық нейрондық белсенділігі (ACx). ACx орташа SAR 0,5 Вт/кг құрайды. Көп бірлікті жазбалар LTE-EMF таза тондарға реакцияның қарқындылығын төмендететінін көрсетеді, ал акустикалық және табиғи орта диапазонды жоғарылатады. жиіліктер.Iba1 иммуногистохимиясы микроглиальды денелер мен процестермен жабылған аумақта ешқандай өзгерістерді көрсетпеді. Дені сау егеуқұйрықтарда бірдей LTE экспозициясы жауап қарқындылығы мен акустикалық шектерде өзгерістерге әкелмеді. Біздің деректеріміз жедел нейроинфламацияның нейрондарды LTE-EMF-нің стимуляциялануының нәтижесінде сезімтал ететінін көрсетеді.
Адамзаттың электромагниттік ортасы соңғы үш онжылдықта сымсыз байланыстың үздіксіз кеңеюіне байланысты күрт өзгерді. Қазіргі уақытта халықтың үштен екісінен астамы ұялы телефонды (МП) пайдаланушылар болып саналады. Бұл технологияның кең ауқымды таралуы импульстік электромагниттік өрістердің (ЭМӨ) ықтимал қауіпті әсерлері туралы алаңдаушылық пен пікірталас тудырды. коммуникациялар. Бұл денсаулық сақтау мәселесі биологиялық тіндердегі радиожиілік жұтылуының әсерін зерттеуге арналған бірқатар эксперименттік зерттеулерді шабыттандырды1. Осы зерттеулердің кейбіреулері MP-ны кеңінен пайдалану кезінде мидың РЖ көздеріне жақындығын ескере отырып, нейрондық желі белсенділігі мен когнитивтік процестердегі өзгерістерді іздеді. (GSM) немесе кең жолақты кодты бөлу көп қол жетімділік (WCDMA)/үшінші буын әмбебап мобильді телекоммуникация жүйелері (WCDMA/3G UMTS)2 ,3,4,5. Long Term Evolution (LTEL21TEL қызметінде) деп аталатын толық цифрлық Интернет протоколы технологиясына негізделген төртінші буын (4G) мобильді қызметтерінде қолданылатын радиожиілік сигналдарының әсері туралы аз белгілі. 2022 жылдың қаңтарында LTE жаһандық жазылушыларының саны 6,6 миллиардқа жетеді деп күтілуде (GSMA: //gsacom.com). Бір операторлық модуляция схемаларына негізделген GSM (2G) және WCDMA (3G) жүйелерімен салыстырғанда, LTE негізгі жиілік диапазонында немесе LTE диапазонында мобильді сигнал пішімін пайдаланудың әртүрлі диапазонында жиілікті ортогоналды бөлуді мультиплекстеуді (OFDM) пайдаланады. 450 және 3700 МГц, соның ішінде 900 және 1800 МГц диапазондары GSM-де де қолданылады.
РЖ әсерінің биологиялық процестерге әсер ету қабілеті негізінен биологиялық тінде жұтылатын энергияны өлшейтін Вт/кг түрінде көрсетілген ерекше сіңіру жылдамдығымен (SAR) анықталады. 2,573 ГГц LTE сигналдарының жаһандық нейрондық желінің белсенділігіне 30 минуттық жедел әсер етудің әсері жақында сау адам еріктілерінде зерттелді. өздігінен баяу жиіліктің ауытқуы және ішкі немесе аймақаралық қосылыстағы өзгерістер, бұл кезде 10 г ұлпадан жоғары кеңістіктегі ең жоғары SAR деңгейлері 7, 8, 9-тақырыптарға сәйкес 0,42 және 1,52 Вт/кг арасында өзгереді деп бағаланды. Ұқсас әсер ету жағдайларында EEG талдауы (30 мин. ұзақтығы, адамның болжалды деңгейі SAR14 Вт/кг. бас моделі) альфа және бета жолақтарында спектрлік қуаттың және жарты шардың когеренттілігін көрсетті. Дегенмен, EEG талдауына негізделген басқа екі зерттеу LTE басының әсерінің 20 немесе 30 минуттық ең жоғары жергілікті SAR деңгейлері шамамен 2 Вт/кг деңгейінде белгіленетінін анықтады, не анықталмайтын әсер11 жоқ немесе альфа диапазонында спектрлік қуаттың төмендеуіне әкеліп соқтырды. 12 .Сондай-ақ GSM немесе UMTS ЭМӨ әсерінің әсерлерін арнайы қарастыратын EEG немесе когнитивтік зерттеулердің нәтижелерінде елеулі айырмашылықтар табылды. Олар сигнал түрі мен модуляциясын, әсер ету қарқындылығы мен ұзақтығын қоса, әдісті жобалаудағы және эксперименттік параметрлердегі өзгерістерден немесе адамның жасына, жынысына қатысты анатомиялық ерекшеліктеріне немесе гетерогенділігіне байланысты деп есептеледі.
Осы уақытқа дейін LTE сигналының әсер етуінің ми қызметіне қалай әсер ететінін анықтау үшін жануарларға бірнеше зерттеулер қолданылған. Жақында дамып келе жатқан тышқандарға эмбриональды кезеңнен бастап емшектен шығаруға дейін жүйелі түрде әсер ету (тәулігіне 30 мин, 5 күн/апта, бүкіл дененің орташа SAR 0,5 немесе 1 Вт/кг) қозғалтқыш пен тәбеттің бұзылуына әкеліп соқтырғаны хабарланды. 6 апта бойы күніне) ересек егеуқұйрықтарда тотығу стрессін тудыратыны және оптикалық нервтен алынған визуалды шақырылатын потенциалдардың амплитудасын төмендететіні анықталды, ең жоғары SAR 10 мВт/кг15 төмен деп бағаланады.
Жасуша және молекулярлық деңгейлерді қоса алғанда, бірнеше масштабта талдауға қосымша, кеміргіштердің үлгілері ауру кезіндегі РЖ әсерінің әсерін зерттеу үшін пайдаланылуы мүмкін, себебі бұрын жедел нейроинфламация контекстінде GSM немесе WCDMA/3G UMTS ЭМӨ-ге бағытталған. Зерттеулер ұстамалардың, нейродегенеративті аурулардың немесе глиомалардың 16,17,18,19,20 әсерін көрсетті.
Липополисахаридті (LPS) енгізетін кеміргіштер жыл сайын халықтың көпшілігіне әсер ететін вирустар немесе бактериялар тудыратын қатерсіз жұқпалы аурулармен байланысты жедел нейроинфекциялық реакциялардың классикалық клиникаға дейінгі моделі болып табылады. Бұл қабыну күйі қайтымды ауруға және безгегімен сипатталатын депрессиялық мінез-құлық синдромына әкеледі, безгегі, әлеуметтік бездің жоғалуы және СҚЖ төмендейді. Микроглия сияқты фагоциттер осы нейроқабыну реакциясының негізгі эффекторлық жасушалары болып табылады. Кеміргіштерді LPS көмегімен емдеу микроглиялардың белсендірілуін тудырады, бұл олардың пішіні мен жасушалық процестерінің қайта құрылуымен және транскриптомдық профильдегі терең өзгерістермен, соның ішінде қабынуға қарсы цитокиндерге немесе ферменттік желілерге22 әсер ететін қабынуға қарсы белсенділікті кодтайтын гендердің жоғарылауымен сипатталады. 23, 24.
LPS-пен өңделген егеуқұйрықтарда GSM-1800 МГц ЭМӨ бір реттік 2 сағаттық бас әсерінің әсерін зерттей отырып, біз GSM сигналының ми қыртысындағы жасушалық реакцияларды қоздыратынын, гендердің экспрессиясына, глутамат рецепторларының фосфорлануына, нейрондық мета-эвакцияланған микроглицера әсерлеріне әсер ететінін анықтадық. бірдей GSM экспозициясын алған дені сау егеуқұйрықтарда анықталмады, бұл LPS-триггерленген нейроқабыну күйі ОЖЖ жасушаларын GSM сигналына сенсибилизациялайды деп болжайды. Жергілікті SAR орташа есеппен 1,55 Вт/кг болатын LPS-пен өңделген егеуқұйрықтардың есту қыртысына (ACx) назар аудара отырып, біз GSM тармақтарының ұзаруы немесе микроэлементтерінің ұзаруын байқадық. таза тондар тудыратын нейрондық жауаптардың төмендеуі және .Табиғи ынталандыру 28.
Ағымдағы зерттеуде біз LTE-1800 МГц сигналдарының тек бас әсер етуі ACx-де микроглиальды морфология мен нейрондық белсенділікті өзгерте ала ма, жоқ па, соны зерттеуді мақсат еттік, бұл әсер ету қуатын үштен екіге азайтады. Біз мұнда LTE сигналының микроглиальды процестерге әсер етпейтінін көрсетеміз, бірақ әлі де LTE-1800 МГц сигналдарының LTE коррекциясының айтарлықтай төмендеуін тудырды. SAR мәні 0,5 Вт/кг егеуқұйрықтар.
GSM-1800 МГц әсерінің қабынуға қарсы жағдайларда микроглиальды морфологияны өзгерткені туралы алдыңғы дәлелдерді ескере отырып, біз LTE сигналының әсерінен кейін бұл әсерді зерттедік.
Ересек егеуқұйрықтарға LPS тек басына жалған әсер етуден немесе LTE-1800 МГц әсер етуден 24 сағат бұрын енгізілді. Әсер ету кезінде ми қыртысында LPS-триггерленген нейроқабыну реакциялары анықталды, бұл қабынуға қарсы гендердің жоғарылауы және кортикальды микроглия әсерінің өзгеруі (морфологиялық микрофлора) арқылы көрсетілген. LTE басы ACx жүйесінде 0,5 Вт/кг орташа SAR деңгейін алуға орнатылды (2-сурет). LPS арқылы белсендірілген микроглия LTE ЭМӨ-ге жауап беретінін анықтау үшін біз осы жасушаларды таңдап алған анти-Iba1 бояуымен боялған кортикальды бөлімдерді талдадық. 3a-суретте көрсетілгендей, ACx-те көрсетілгендей, LTE-ден LTE-ге дейін микросағаттан кейін өңделген секциялар түзетілген. айтарлықтай ұқсас, LPS қабынуға қарсы емі арқылы туындаған «тығыз тәрізді» жасуша морфологиясын көрсетеді (1-сурет). Морфологиялық жауаптардың болмауына сәйкес, кескіннің сандық талдауы жалпы аумақта (жұпталмаған t-тест, p = 0,308) немесе аумақта (p = 0,1 және тығыздықта) айтарлықтай айырмашылықтарды анықтаған жоқ. 0,061) Iba1 иммунореактивтілігі LTE егеуқұйрықтарындағы Iba 1-боялған жасуша денелерінің әсерін жалған әсер еткен жануарлармен салыстыру кезінде (3b-d-сурет).
LPS ip инъекциясының кортикальды микроглия морфологиясына әсері. Ми қыртысының корональды бөліміндегі микроглиялардың репрезентативті көрінісі (дорсодиальды аймақ) LPS немесе көлік құралын құрсақішілік инъекциядан кейін 24 сағаттан кейін (бақылау). Жасушалар Iba1 антиденелерімен боялған, алдын ала өңделген микроглия антиденелерімен боялған. морфологиясы, соның ішінде проксимальды қалыңдауды және жасушалық процестердің қысқа қайталама тармақтарының ұлғаюын, нәтижесінде «тығыз тәрізді» пайда болады. Масштаб жолағы: 20 мкм.
1800 МГц LTE әсер ету кезінде егеуқұйрық миындағы ерекше сіңіру жылдамдығының (SAR) дозиметриялық талдауы. Бұрын сипатталған фантомдық егеуқұйрық пен цикл антеннасының62 гетерогенді моделі 0,5 мм3 текше торы бар мидағы жергілікті SAR бағалау үшін пайдаланылды.(a) егеуқұйрықтың басының үстіндегі металды орнату үлгісінің жаһандық көрінісі дененің астындағы төсеніш (сары).(b) 0,5 мм3 кеңістіктік рұқсатта ересек адамның миындағы SAR мәндерінің таралуы. Сагиттальды бөлімдегі қара контурмен шектелген аймақ микроглиальды және нейрондық белсенділік талданатын негізгі есту қыртысына сәйкес келеді. SAR мәндерінің түспен кодталған шкаласы барлық цифрларда көрсетілген симуляцияларға қолданылады.
LTE немесе Sham әсерінен кейін егеуқұйрықтың есту қыртысындағы LPS инъекцияланған микроглия.(a) Sham немесе LTE әсерінен 3-4 сағаттан кейін LPS-перфузияланған егеуқұйрықтың есту қыртысының тәж бөліктеріндегі анти-Iba1 антиденелерімен боялған микроглиялардың репрезентативті қабаттасқан көрінісі (Морфометрлік 2мк0) экспозиция. жалған (ашық нүктелер) немесе LTE әсерінен (ашық, қара нүктелер) кейін 3-4 сағаттан кейін микроглияны бағалау.(b, c) Iba1 микроглия маркерінің кеңістіктік қамтуы (b) және Iba1-оң жасуша денелерінің аумақтары (c). Деректер Шамнан (ашық нүктелер) немесе LTE-экспозицияланған жануарлардан алынған орташа мәнге қалыпқа келтірілген анти-Iba1 бояу аймағын көрсетеді. ұяшық денелері. Шам (n = 5) және LTE (n = 6) жануарлары арасындағы айырмашылықтар маңызды болмады (p > 0,05, жұпталмаған t-сынағы). Қораптың үстіңгі және төменгі жағы, жоғарғы және төменгі сызықтар тиісінше 25-75-ші және 5-95-ші пайыздық аралықты білдіреді. Орташа мән қызыл түспен белгіленген.
1-кестеде егеуқұйрықтардың төрт тобының (Sham, Exposed, Sham-LPS, Exposed-LPS) бастапқы есту қыртысында алынған жануарлар сандары мен көп бірлікті жазбалар жинақталған. Төмендегі нәтижелерге біз айтарлықтай спектрлік уақытша қабылдау өрісін (STRF) көрсететін барлық жазбаларды қосамыз, яғни, дыбысты қоздыратын стандартты реакциялардың ең төмен жылдамдығынан жоғарырақ. (1-кестені қараңыз). Осы критерийді қолдана отырып, біз Sham тобы үшін 266 жазбаны, Exposed тобы үшін 273 жазбаны, Sham-LPS тобы үшін 299 жазбаны және Exposed-LPS тобы үшін 295 жазбаны таңдадық.
Келесі параграфтарда біз алдымен спектрлік-уақытша рецептивті өрістен алынған параметрлерді (яғни таза тондарға жауап) және ксеногендік спецификалық дыбыстарға реакцияны сипаттайтын боламыз. Содан кейін біз әрбір топ үшін алынған жиілік жауап беру аймағының сандық көрсеткіштерін сипаттаймыз. «Ұяланған деректер» 30 болуын ескере отырып, біздің эксперименттік позициялардағы электродтардың статистикалық талдауы негізінде орындалды. массив (1-кестедегі соңғы жол), бірақ төменде сипатталған барлық әсерлер де әр топтағы позициялар санына негізделген. Жиналған көп бірлік жазбалардың жалпы саны (1-кестедегі үшінші жол).
4a суреті LPS-өңделген Шамда және ашық жануарларда алынған кортикальды нейрондардың оңтайлы жиілік таралуын (BF, максималды жауап беру) көрсетеді. сынамаларды таңдаусыз жасалған.
LTE әсерінің LPS-пен өңделген жануарлардағы кортикальды жауаптардың сандық параметрлеріне әсері. (a) LTE (қара) әсеріне ұшыраған LPS-пен өңделген жануарлардың кортикальды нейрондарында BF таралуы (ақ) және LTE-ге жалған әсер ету. Екі таралу арасында ешқандай айырмашылық жоқ. (STRF). Жауап беру күші STRF (жалпы жауап күші) және оңтайлы жиіліктер (b,c) бойынша айтарлықтай төмендеді (*p <0,05, жұпталмаған t-сынағы).Жауап ұзақтығы, жауап өткізу қабілеті және өткізу қабілеттілігі тұрақтысы (df). Дауыстарға жауаптардың күші де, уақытша сенімділігі де азайған жоқ (белсенділік айтарлықтай төмендемеді). < 0,05, жұпталмаған t-тест).(j,k) LTE әсерінің кортикальды шектерге әсері. Орташа шекті мәндер LTE әсеріне ұшыраған егеуқұйрықтарда жалған егеуқұйрықтармен салыстырғанда айтарлықтай жоғары болды. Бұл әсер төменгі және орташа жиіліктерде айқынырақ.
4b-f суреттері осы жануарларға арналған STRF-ден алынған параметрлердің таралуын көрсетеді (қызыл сызықтармен көрсетілген құралдар). LPS-пен өңделген жануарларға LTE әсерінің әсері нейрондық қозғыштығының төмендегенін көрсетеді. Біріншіден, жалпы жауап қарқындылығы мен жауаптар Шам-LPS жануарларымен салыстырғанда BF-де айтарлықтай төмен болды (Cурет = сыналмаған p4, c. 0.0017; және p = 0.0445). Сол сияқты, байланыс дыбыстарына жауаптар жауап күші мен сынақ аралық сенімділікте төмендеді (сурет 4g, h; жұпталмаған t-тест, p = 0.043). Спонтанды белсенділік төмендеді, бірақ бұл әсер маңызды болмады (сурет 0.04, 5-сурет). және жауап кідірісі LPS-пен өңделген жануарларда LTE әсерінен әсер етпеді (4d-f-сурет), бұл жиілік селективтілігі мен басталатын жауаптардың дәлдігі LPS-пен өңделген жануарлардағы LTE әсерінен әсер етпегенін көрсетеді.
Әрі қарай біз таза тондық кортикальды шектердің LTE экспозициясы арқылы өзгерген-өзгермегенін бағаладық. Әрбір жазбадан алынған жиілікке жауап беру аймағынан (FRA) біз әрбір жиілік үшін есту шектерін анықтадық және жануарлардың екі тобы үшін де осы шектердің орташа мәнін анықтадық. 4j-суретте орташа (± сем) шектер көрсетілген. Sham және Exposed топтарының есту табалдырықтары Шам жануарларымен салыстырғанда (4j-сурет) ұшыраған жануарларда шектердің айтарлықтай жоғарылағанын көрсетті, бұл әсер төмен және орташа жиіліктерде айқынырақ болды. Дәлірек айтқанда, төмен жиіліктерде (< 2,25 кГц), жоғары A1 және неурресурстардың үлесі жоғары болған кезде. шекті нейрондар төмендеді (хи-квадрат = 43,85; p <0,0001; 4к-сурет, сол жақ сурет) . Дәл осындай әсер орташа жиілікте (2,25 < Freq(kHz) < 11) байқалды: экспозицияланбаған топпен салыстырғанда аралық шектері бар кортикальды жазбалардың жоғары үлесі және төменгі шегі бар нейрондардың азырақ үлесі (Chi - шаршы = 71,17; p <0,04k, ортаңғы айырмашылық панелі де айтарлықтай болды). жоғары жиілікті нейрондар үшін (≥ 11 кГц, p = 0,0059); төменгі шекті нейрондардың үлесі төмендеді және орта-жоғары шектің үлесі өсті (хи-квадрат = 10,853; p = 0,04 4k суреті, оң жақ панель).
5a суретте Шам және Экспозиция топтары үшін сау жануарларда алынған кортикальды нейрондардың оңтайлы жиілік таралуы (BF, максималды жауап беру) көрсетілген.
LTE экспозициясының сау жануарлардағы кортикальды жауаптардың сандық параметрлеріне әсері.(a) LTE (қара көк) әсер еткен сау жануарлардың кортикальды нейрондарында BF таралуы (қою көк) және LTE-ге (ашық көк) әсер етеді. Екі таралу арасында ешқандай айырмашылық жоқ. STRF және оңтайлы жиіліктер (b,c) бойынша жауап қарқындылығының өзгеруі. Жауап ұзақтығының шамалы артуы (d), бірақ жауап өткізу қабілеті мен өткізу қабілеттілігінде (e, f) өзгеріс жоқ. Дауыстарға жауаптардың күші де, уақытша сенімділігі де өзгерген жоқ (g, h). Өздігінен пайда болған белсенділікте айтарлықтай өзгеріс болған жоқ (i0.5p
5j суретте сау егеуқұйрықтардағы 1,1-ден 36 кГц-ке дейінгі орташа (± сем) шекті мәндер көрсетілген. Ол жоғары жиіліктегі (11–36 кГц) әсер еткен жануарлардағы сәл төменірек шекті қоспағанда, жалған және ашық егеуқұйрықтар арасында айтарлықтай айырмашылықты көрсетпеді (жұптастырылмаған t-сынағы, p = 0.0, оның әсерін көрсетеді). жиілік диапазоны (хи-квадрат = 18,312, p = 0,001; 5к-сурет), төмен және орташа табалдырықтары бар нейрондар (жоғары шектерде) аз нейрондар болды).
Қорытындылай келе, сау жануарлар LTE әсеріне ұшыраған кезде, таза тондар мен күрделі дыбыстарға жауап беру күшіне әсер етпеді, мысалы, дауыс шығару сияқты. Сонымен қатар, сау жануарларда кортикальды есту табалдырықтары зардап шеккен және жалған жануарлар арасында ұқсас болды, ал LPS-пен өңделген жануарларда LTE әсер ету, әсіресе төменгі және орташа жиілік диапазонының айтарлықтай артуына әкелді.
Біздің зерттеуіміз жедел нейроинфламацияны бастан өткерген ересек еркек егеуқұйрықтарда жергілікті SARACx 0,5 Вт/кг (Әдістерді қараңыз) LTE-1800 МГц әсерінің коммуникацияның бастапқы жазбаларындағы дыбыстық реакциялардың қарқындылығының айтарлықтай төмендеуіне әкелетінін көрсетті. Бұл өзгерістер нейрондық қолданбалы аймақтың кез келген өзгерісінсіз орын алды. микроглиальды процестермен қамтылған. LTE-нің кортикальды шақырылған реакциялардың қарқындылығына бұл әсері сау егеуқұйрықтарда байқалған жоқ. LTE әсер еткен және жалған әсер ететін жануарлардағы тіркеу бірліктері арасындағы оңтайлы жиілікті бөлудің ұқсастығын ескере отырып, нейрондық реактивтіліктің айырмашылығын LTE сигналдарының биологиялық әсерлеріне жатқызуға болады (сынама алудағы абсолюттік өзгерістерге қарағанда). LTE әсеріне ұшыраған егеуқұйрықтардағы жауаптың кешігуі және спектрлік баптау өткізу қабілеттілігі, бұл жазбалар қайталама аймақтардан гөрі бастапқы ACx-де орналасқан бірдей кортикальды қабаттардан алынғанын көрсетеді.
Біздің білуімізше, LTE сигналының нейрондық жауаптарға әсері бұрын хабарланған жоқ. Дегенмен, алдыңғы зерттеулер GSM-1800 МГц немесе 1800 МГц үздіксіз толқынның (CW) тәжірибелік тәсілге байланысты айтарлықтай айырмашылықтары болса да, нейрондық қозғыштығын өзгерту қабілетін құжаттады. CW/200 CWAR деңгейінде әсер еткеннен кейін көп ұзамай. ұлулардың ганглийлерінен алынған жазбалар әсер ету потенциалдары мен нейрондық модуляцияны іске қосу шегінің төмендегенін көрсетті. Екінші жағынан, егеуқұйрықтардың миынан алынған бастапқы нейрондық мәдениеттердегі серпілу және жарылу белсенділігі WSM-1800 МГц немесе 1800 МГц CW әсерінен 15 минут бойы оның SAR/kg бөлігінде 15 минут бойы азайған. 30 минут экспозиция. Нейрондардың толық үнсіздігі 9,2 Вт/кг SAR кезінде қол жеткізілді. Дозаға-жауап талдауы GSM-1800 МГц 1800 МГц CW-ге қарағанда серпіліс белсенділігін басуда тиімдірек екенін көрсетті, бұл нейрондық жауаптардың РЖ сигналының модуляциясына байланысты екенін көрсетеді.
Біздің жағдайымызда кортикальды қоздырылған жауаптар 2 сағаттық басына ғана әсер ету аяқталғаннан кейін 3-6 сағат ішінде in vivo жиналды. Алдыңғы зерттеуде біз GSM-1800 МГц SARACx 1,55 Вт/кг әсерін зерттедік және дені сау егеуқұйрықтар мен егеуқұйрықтардағы маңызды кортикальды әсерлерге айтарлықтай әсер етпедік. 0,5 Вт/кг SARACx кезінде LTE-1800 әсері таза тондарды көрсету кезінде жауап ұзақтығының шамалы ұлғаюы болды. Бұл әсерді түсіндіру қиын, өйткені ол жауап қарқындылығының жоғарылауымен бірге жүрмейді, бұл ұзақ жауап беру ұзақтығы LTE-1800 әсерінің жалпы санымен бірге жүреді деп болжайды, бұл кортикальды несептердің экспозициясының төмендеуі мүмкін. кейбір ингибиторлық интернейрондар, өйткені бастапқы ACx алға қарай кері тежелу қоздырғыш таламикалық кіріс арқылы іске қосылған пирамидалық жасуша жауаптарының ұзақтығын бақылайды33,34, 35, 36, 37.
Керісінше, LPS-триггерленген нейроинфламацияға ұшыраған егеуқұйрықтарда LTE экспозициясы дыбыс тудыратын нейрондық атудың ұзақтығына әсер етпеді, бірақ қоздырылған жауаптардың күшіне елеулі әсерлер анықталды. Іс жүзінде, LPS-шамға ұшыраған егеуқұйрықтарда жазылған нейрондық жауаптармен салыстырғанда, LPS-ке ұшыраған нейрондық реакциялар олардың жауаптарының интенсивтілігінің төмендеуі, таза тондарды көрсету кезінде де, табиғи дауысты дыбыстар да байқалатын әсер .Таза тондарға жауап беру қарқындылығының төмендеуі 75 дБ спектрлік баптау өткізу жолағын тарылтпастан болды және ол барлық дыбыс қарқындылығында болғандықтан, ол дыбыстың орташа және төменгі акустикалық қысымының жоғарылауына әкелді. жиіліктер.
Қоздырылған жауап күшінің төмендеуі LPS-пен өңделген жануарларда SARACx 0,5 Вт/кг LTE сигналының әсері үш есе жоғары SARACx (1,55 Вт/кг) қолданылған GSM-1800 МГц әсеріне ұқсас екенін көрсетті 28. GSM сигнализациясына келетін болсақ, LTE-1800 МГц экспозициясының не қабілеттілігін төмендетуі мүмкін. LPS-триггерленген нейроинфламацияға ұшырады.Осы гипотезаға сәйкес, біз сондай-ақ дауыс шығаруға нейрондық жауаптардың сынақ сенімділігінің төмендеуіне қарай тенденцияны байқадық (4h-сурет) және стихиялы белсенділіктің төмендеуі (4i-сурет).Алайда, LTE сигнализациясының нейрондық, синоптикалық әсерді төмендететінін немесе төмендететінін in vivo анықтау қиын болды. ACx нейрондық жауаптарды бақылау.
Біріншіден, бұл әлсіз жауаптар LTE 1800 МГц әсерінен кейін кортикальды жасушалардың қозғыштығының ішкі төмендеуіне байланысты болуы мүмкін. Осы идеяны қолдайтын GSM-1800 МГц және 1800 МГц-CW қыртыстық егеуқұйрық нейрондарының бастапқы мәдениеттеріне тікелей қолданғанда SAR деңгейі 2 Вт/кг 6, кг. бірақ жарылу белсенділігін айтарлықтай төмендету үшін шекті SAR деңгейі қажет болды. Ішкі қозғыштығының төмендеуін жақтай отырып, біз сондай-ақ жалаңаштанған жануарларға қарағанда ашық жануарларда өздігінен ату жылдамдығын байқадық.
Екіншіден, LTE экспозициясы таламо-кортикальды немесе кортикальды-кортикальды синапстардан синаптикалық беріліске де әсер етуі мүмкін. Қазір көптеген жазбалар есту қыртысында спектрлік реттеудің кеңдігі афферентті таламикалық проекциялармен ғана анықталмайтынын көрсетеді, бірақ интракортикалық байланыстар біздің қыртыстық тәжірибеге қосымша спектрлік енгізуді қамтамасыз етеді390. STRF әсеріне ұшыраған және жалған әсер ететін жануарларда ұқсас өткізу қабілеттілігін көрсетті жанама түрде LTE әсерінің әсерлері кортикальды-кортикальды байланысқа әсер етпеді. Бұл сонымен қатар ACx (Cурет 2) өлшенгеннен SAR әсеріне ұшыраған басқа кортикальды аймақтардағы жоғары байланыс осы жерде хабарланған өзгертілген жауаптар үшін жауапты болмауы мүмкін екенін көрсетеді.
Мұнда LPS әсер еткен кортикальды жазбалардың көп бөлігі LPS-шамға ұшыраған жануарлармен салыстырғанда жоғары шектерді көрсетті. Кортикальды акустикалық табалдырық ең алдымен таламо-кортикальды синапстың күшімен бақыланады 39,40 деп ұсынылғанын ескере отырып, бұл трансмиссияны ішінара төмендетеді деп күдіктенуге болады. пресинаптикалық (глутаматтың шығарылуының төмендеуі) немесе постсинаптикалық деңгей (рецепторлар санының немесе жақындықтың төмендеуі).
GSM-1800 МГц әсерлеріне ұқсас, LTE-индукцияланған нейрондық жауаптар микроглиальды жауаптармен сипатталатын LPS-триггерленген нейрондық қабыну контекстінде орын алды. Қазіргі деректер микроглия қалыпты және патологиялық мидағы нейрондық желілердің белсенділігіне қатты әсер ететінін көрсетеді41,42,43. Олар қосылыстардың нейротрансляциясының модуляциялану қабілетіне ғана байланысты емес. Бұл нейротрансмиссияны шектей алады немесе шектей алады, сонымен қатар олардың жасушалық процестерінің жоғары қозғалғыштығына әсер етеді. Ми қыртысында нейрондық желілердің белсенділігінің жоғарылауы да, төмендеуі де микроглиальды процестердің өсуіне байланысты микроглиальды кеңістіктік доменнің жылдам кеңеюін тудырады44,45. Атап айтқанда, микроглиальды шығыңқылар экстрепараттардың синтатикалық және экстрепараттық белсенділігін тежей алады. микроглия арқылы жергілікті аденозин өндіруді қамтитын механизмдер арқылы синапстар.
1,55 Вт/кг SARACx бар GSM-1800 МГц-ке жіберілген LPS-өңделген егеуқұйрықтарда ACx28 ұлғаюында айтарлықтай Iba1-боялған аймақтармен белгіленген микроглиальды процестердің өсуімен ACx нейрондарының белсенділігі төмендеді. Бұл бақылау микроглиалды қайта құру GSM-ге белсенді түрде әсер етуі мүмкін екенін көрсетеді. дыбысты тудыратын нейрондық жауаптардың төмендеуі. Біздің қазіргі зерттеуіміз SARACx-пен 0,5 Вт/кг шектелген LTE бас экспозициясы контекстінде бұл гипотезаға қарсы шығады, өйткені біз микроглиальды процестермен қамтылған кеңістіктік доменнің ұлғаюын таппадық. Дегенмен, бұл LTE сигналының қандай да бір әсерін жоққа шығармайды. және жедел нейрондық қабынудың LTE сигналына нейрондық жауаптарды өзгертетін механизмдерін анықтау.
Біздің білуімізше, LTE сигналдарының естуді өңдеуге әсері бұрын зерттелген жоқ. Біздің алдыңғы зерттеулеріміз 26,28 және қазіргі зерттеу жедел қабыну жағдайында бастың жалғыз GSM-1800 МГц немесе LTE-1800 МГц әсер етуі нейрондық жауаптардың кем дегенде екі есе жоғарылауына әкеліп соқтырды. Негізгі себептерге байланысты, кохлеарлық функцияға LTE экспозициямыз әсер етпеуі керек. Біріншіден, 2-суретте көрсетілген дозиметриялық зерттеуде көрсетілгендей, SAR ең жоғары деңгейлері (1 Вт/кг-ға жуық) дорсодиальды қыртыста (антеннаның астында) орналасады және олар адамның бүйірден және бүйірінен көбірек қозғалған сайын айтарлықтай төмендейді. Вт/кг егеуқұйрық түйнегі деңгейінде (құлақ каналының астында). Екіншіден, теңіз шошқасының құлақтары GSM 900 МГц жиілігінде (5 күн/апта, 1 сағат/тәу, 1-ден 4 Вт/кг аралығындағы SAR) 2 ай бойы әсер еткенде, E есту қабілетінің бұзылуының және E есту түтігінің респонденттерінің бұзылуының шамасында анықталатын өзгерістер болған жоқ. 47.Сонымен қатар, GSM 900 немесе 1800 МГц жиілігінің 2 Вт/кг жергілікті SAR деңгейінде қайталанатын бас әсер етуі сау егеуқұйрықтардағы кохлеарлы сыртқы шаш жасушаларының қызметіне әсер етпеді48,49. Бұл нәтижелер адамдарда алынған деректердің жаңғырығына сәйкес келеді, мұнда зерттеулер 10-30 минуттық MF телефонының ESM әсерінен аудиторлық процесс әсер етпейтінін көрсетті. кохлеар50,51,52 немесе ми бағанасы деңгейінде бағаланады53,54.
Біздің зерттеуімізде LTE-триггерленген нейрондық өршу өзгерістері әсер ету аяқталғаннан кейін 3-6 сағаттан кейін in vivo байқалды. Кортекстің дорсодиальды бөлігіне жүргізілген алдыңғы зерттеуде экспозициядан кейін 24 сағаттан кейін байқалған GSM-1800 МГц индукцияланған бірнеше әсерлер экспозициядан кейін 72 сағаттан кейін бұдан былай анықталмады. IL-1ß гені және AMPA рецепторларының трансляциядан кейінгі модификациясы. Есту қабығының дорсодиальды аймаққа (2,94 Вт/кг26) қарағанда SAR мәні (0,5 Вт/кг) төмен екенін ескере отырып, мұнда хабарланған нейрондық белсенділіктегі өзгерістер өтпелі болып көрінеді.
Біздің деректеріміз ұялы телефон пайдаланушыларының церебральды қыртысында қол жеткізілген SAR мәндерінің сәйкестік шектерін және нақты SAR мәндерін бағалауды ескеруі керек. Қоғамды қорғау үшін қолданылатын қолданыстағы стандарттар 100 кГц және 6 ГГц РЖ диапазонындағы радиожиіліктердің бас немесе дененің локализацияланған әсері үшін SAR шегін 2 Вт/кг етіп белгілейді.
Жалпы бас немесе ұялы телефон байланысы кезінде бастың әртүрлі тіндеріндегі радиожиілік қуатының жұтылуын анықтау үшін дозаны модельдеу адам басының әртүрлі үлгілері арқылы орындалды. Адам басының үлгілерінің әртүрлілігіне қоса, бұл модельдеу анатомиялық немесе гистологиялық параметрлер негізінде ми сіңіретін энергияны бағалаудағы маңызды айырмашылықтарды немесе белгісіздіктерді, мысалы, бастың сыртқы немесе ішкі мазмұны, бас тінінің қалыңдығы, егер бас тінінің қалыңдығы, D. жасына, жынысына немесе жеке 56,57,58.Сонымен қатар, ұялы телефон сипаттамалары, мысалы, антеннаның ішкі орналасуы және ұялы телефонның пайдаланушының басына қатысты орналасуы, ми қыртысындағы SAR мәндерінің деңгейі мен таралуына қатты әсер етеді59,60. Дегенмен, SAR ұялы телефонының мидың жасушалық үлгілерінде анықталған таралу үлгілерін ескере отырып, 1800 МГц диапазонындағы радиожиіліктер58, 59, 60, адамның есту қыртысында қол жеткізілген SAR деңгейлері әлі де адамның ми қыртысының жартысына жетпейтін сияқты. Біздің зерттеуіміз (SARACx 0,5 Вт/кг). Сондықтан, біздің деректер SAR жалпыға ортақ мәндерінің ағымдағы шектеулеріне қарсы тұрмайды.
Қорытындылай келе, біздің зерттеуіміз LTE-1800 МГц-ге бір реттік әсер ету кортикальды нейрондардың сенсорлық тітіркендіргіштерге нейрондық жауаптарына кедергі келтіретінін көрсетеді. GSM сигнализациясының әсерлерінің алдыңғы сипаттамаларына сәйкес, біздің нәтижелеріміз LTE сигналының нейрондық белсенділікке әсері денсаулық жағдайына байланысты өзгеретінін көрсетеді. МГц, нәтижесінде есту тітіркендіргіштерінің кортикальды өңдеуі өзгереді.
Деректер Янвье зертханасында алынған 31 ересек еркек Wistar егеуқұйрықтарының ми қыртысынан 55 күндік жаста жиналды. Егеуқұйрықтар ылғалдылық (50-55%) және температура (22-24 °C) бақыланатын бөлмеде жарық/қараңғы циклі 12 сағ/12 сағ және сумен (жарық 03.00-ге дейін) тегін қолжетімділікпен орналастырылды. эксперименттер Еуропалық қауымдастықтар кеңесі директивасымен (2010/63/ЕО Кеңесінің директивасы) белгіленген нұсқауларға сәйкес орындалды, олар нейробиология қоғамының жануарларды нейробиологиялық зерттеулерде пайдалану жөніндегі нұсқаулықтарында сипатталғандарға ұқсас. Бұл хаттама Париж-Суд және Ұлттық орталық (CEEA N°19, Procol20, Project-25) этика комитетімен мақұлданған. 03729.02) осы комитетпен бекітілген 32-2011 және 34-2012 рәсімдерді пайдалана отырып.
Жануарлар LPS емдеуден және LTE-EMF әсерінен (немесе жалған әсер етуден) кем дегенде 1 апта бұрын колония камераларына үйренді.
Жиырма екі егеуқұйрық LTE немесе жасанды әсер етуден 24 сағат бұрын стерильді эндотоксинсіз изотоникалық физиологиялық ерітіндімен сұйылтылған E. coli LPS (250 мкг/кг, серотип 0127:B8, SIGMA) интраперитональды (ip) енгізілді (әр топқа n). = 11). 2 айлық Wistar еркек егеуқұйрықтарда бұл LPS емі ми қыртысында бірнеше қабынуға қарсы гендермен (ісік некрозының факторы-альфа, интерлейкин 1ß, CCL2, NOX2, LPS2-ден кейін LPS2-ге дейін көтерілгеннен кейін) белгіленетін нейроқабыну реакциясын тудырады. NOX2 ферментін және интерлейкин 1ß кодтайтын транскрипттер деңгейлерінің сәйкесінше 4- және 12 есе артуы. Осы 24 сағаттық уақыт нүктесінде кортикальды микроглия LPS-қоздыратын жасушалардың қабынуға қарсы белсендірілуі күтілетін типтік «тығыз» жасуша морфологиясын көрсетті (бұл LPS 1-ге қосылатын), басқалардың белсендіруі. Жасушалық қабынуға қарсы белсендіру 24, 61 сәйкес келеді.
GSM EMF26 әсерін бағалау үшін бұрын пайдаланылған эксперименттік қондырғыны қолдану арқылы LTE ЭМӨ тек басты әсер ету орындалды. LTE экспозициясы LPS инъекциясынан кейін 24 сағаттан кейін орындалды (11 жануар) немесе LPS өңдеуі жоқ (5 жануар). Жануарлар кетамин/ксилазинмен жеңіл жансыздандырылды (кетамин/клазинмен (кетамин, 810 мг/кг, ipyla)/x10 мг; қозғалысты болдырмау үшін және жануардың басы LTE сигналын шығаратын циклдік антеннада болуын қамтамасыз ету үшін төменде қайталанатын орын. Бір тордағы егеуқұйрықтардың жартысы басқару элементтері ретінде қызмет етті (LPS-пен алдын ала өңделген 22 егеуқұйрықтың 11 жалған жануар): олар контурлық антеннаның астына орналастырылды және LTE сигналын шығарды. жануарлар ұқсас болды (p = 0,558, жұпталмаған t-сынағы, ns). Барлық жансыздандырылған жануарлар дене температурасын эксперимент бойы 37°C шамасында ұстап тұру үшін металсыз қыздырғыш төсемге орналастырылды. Алдыңғы эксперименттердегідей, экспозиция уақыты 2 сағатқа орнатылды. Экспозициядан кейін жануарды басқа жылыту алаңына орналастырыңыз. (LPS-пен өңделмеген), олардың жартысы бір тордан жалған әсер еткен (p = 0,694).
Экспозиция жүйесі алдыңғы зерттеулерде сипатталған 25, 62 жүйелерге ұқсас болды, радиожиілік генераторы GSM электромагниттік өрістерінің орнына LTE генерациясына ауыстырылды. Қысқаша айтқанда, RF генераторы (SMBV100A, 3,2 ГГц, Rohde & Schwarz, Германия) LTE шығаратын - 1800 МГц (am24W электромагниттік өріске қосылды. Mini-Circuits, АҚШ), циркулятор (D3 1719-N, Sodhy, Франция), екі жақты қосқыш (CD D 1824-2, − 30 дБ, Содхи, Франция) және төрт жақты қуат бөлгіші (DC D 0922-4N, Sodhy, Франция), бір мезгілде төрт жануарды (Agil, Expert Agil, NA12) қуатты өлшеуге мүмкіндік береді. АҚШ) қос бағытты қосқышқа жалғанған құрылғыдағы инцидент пен шағылысқан қуатты үздіксіз өлшеуге және бақылауға мүмкіндік берді. Әрбір шығыс контурлық антеннаға (Sama-Sistemi srl; Roma) қосылып, жануардың басын ішінара экспозициялауға мүмкіндік берді. Ілмек антеннасы екі металл сызығы бар баспа тізбегінен тұрады (диэлектрлік тұрақты εr = 4ox. in engraved on4oxs) субстрат. Бір ұшында құрылғы жануардың басына жақын орналасқан сақинаны құрайтын ені 1 мм сымнан тұрады. Алдыңғы зерттеулердегідей26,62, меншікті сіңіру жылдамдығы (SAR) сандық егеуқұйрық моделі және соңғы айырмашылық уақыт домені (FDTD) әдісі арқылы сандық түрде анықталды. Бұл жағдайда Вт/кг-дағы SAR мына формула бойынша есептеледі: SAR = C ΔT/Δt, мұндағы С - Дж/(кг К), ΔT, °K және Δt-дегі жылу сыйымдылығы Температураның өзгеруі, секундтағы уақыт. Сандық түрде анықталған SAR мәндері егеуқұйрықтардың эквивалды аймағындағы, әсіресе эквивальді модельдер арасындағы айырмашылықты қолдану арқылы алынған тәжірибелік SAR мәндерімен салыстырылды. сандық SAR өлшемдері және эксперименталды түрде анықталған SAR мәндері 30%-дан аз.
2а-суретте егеуқұйрық үлгісіндегі егеуқұйрықтардың миындағы SAR таралуы көрсетілген, ол біздің зерттеуде пайдаланылған егеуқұйрықтардың дене салмағы мен өлшемі бойынша үлестірімге сәйкес келеді. Мидың орташа SAR мәні 0,37 ± 0,23 Вт/кг (орташа ± SD) болды. SAR мәндері контурлық антеннаның дәл астындағы кортикальды аймақта ең жоғары. 0,08 Вт/кг (орташа ± SD) (2б-сурет). Әсерге ұшыраған егеуқұйрықтардың дене салмағы біртекті болғандықтан және бас тінінің қалыңдығындағы айырмашылықтар шамалы болғандықтан, ACx немесе басқа кортикальды аймақтардың нақты SAR бір ұшыраған жануар мен екіншісі арасында өте ұқсас болады деп күтілуде.
Экспозицияның соңында жануарларға кетаминнің (20 мг/кг, ип) және ксилазиннің (4 мг/кг, ип) қосымша дозалары артқы табанын қысқаннан кейін рефлекторлық қозғалыстар байқалмайынша толықтырылды. Тері астына жергілікті анестетик (ксилокаин 2%) енгізілді және жануарлардың үстіне металдан бос бұлшықеттер қойылды. жүйесі.Жануарды стереотаксикалық жақтауға орналастырғаннан кейін сол жақ самай қыртысына краниотомия жасалды.Біздің алдыңғы зерттеуіміздегідей66 қабырғалық және самай сүйектерінің түйіскен жерінен бастап, ені 9 мм және биіктігі 5 мм. ACx үстіндегі дураны бинокулярлы бақылаумен мұқият алып тастады, қан тамырларының ұшына зақым келтірместен. жазу кезінде жануардың басын атравматикалық бекітуге арналған акрил цементі. Жануарды қолдайтын стереотаксикалық жақтауды акустикалық әлсірету камерасына салыңыз (IAC, AC1 үлгісі).
Деректер 20 егеуқұйрықтың, оның ішінде LPS-пен алдын ала өңделген 10 жануардың бастапқы есту қабығындағы көп блокты жазбалардан алынды. Жасушадан тыс жазбалар екі қатардан (80м5м3д арақашықтықта) электродтар арасындағы аралығы 800м3д болатын 16 вольфрам электродтарының (TDT, ø: 33 мкм, < 1 МΩ) массивінен алынды. бір қатардағы электродтар). Жерге қосуға арналған күміс сым (ø: 300 мкм) уақытша сүйек пен қарама-қарсы дура арасына салынды. Бастапқы ACx-тің болжамды орны брегмадан 4-7 мм артта және супратерпоральды тігістен 3 мм вентральды. көп арналы деректерді жинау жүйесі (RX5, TDT). Әр электродтан жиналған сигналдар сүзгіден өтті (610–10 000 Гц) Көп блоктық белсенділікті (MUA) алу үшін. Триггер деңгейлері әрбір электрод үшін мұқият орнатылды (ашық немесе жалған әсер ету күйлеріне соқыр авторлар арқылы). Мұнда жиналған MUA электродтардың жанында 3-тен 6-ға дейінгі нейрондар тудыратын әрекет потенциалдарынан тұрды.Әр тәжірибенің басында біз сегіз электродтың екі қатары ростральды бағытта орындалған кезде төмен жиіліктен жоғары жиілікті жауаптарға дейінгі нейрондарды сынай алатындай етіп электродтар жиымының орнын орнаттық.
Акустикалық тітіркендіргіштер Matlab жүйесінде жасалды, RP2.1 негізіндегі дыбысты жеткізу жүйесіне (TDT) жіберілді және Fostex динамикіне (FE87E) жіберілді. Дауыс зорайтқыш егеуқұйрықтың оң құлағынан 2 см қашықтықта орналастырылды, бұл қашықтықта динамик 130 кГц пен 130 кГц аралығындағы жалпақ жиілік спектрін (± 3 дБ) шығарды. B&K 2169 алдын ала күшейткішімен және Marantz PMD671 цифрлық жазу құрылғысымен біріктірілген Bruel және Kjaer микрофоны 4133 көмегімен жазылған шу мен таза тондарды қолдану арқылы орындалды. Спектрлік уақытты қабылдау өрісі (STRF) 8 (0,14 двеста) кездейсоқ ретпен ұсынылған 8 кГц-65 д/б ретті қамтитын 97 гамма-тонды жиіліктердің көмегімен анықталды. 4,15 Гц жиіліктегі SPL. Жиілік жауап беру аймағы (FRA) бірдей тондар жиынтығы арқылы анықталады және 2 Гц жиілікте 75-тен 5 дБ SPL-ге дейін кездейсоқ ретпен беріледі. Әрбір жиілік әр қарқындылықта сегіз рет көрсетіледі.
Табиғи тітіркендіргіштерге жауаптар да бағаланды. Алдыңғы зерттеулерде біз егеуқұйрықтардың дауыс беруі нейрондық оңтайлы жиілікке (BF) қарамастан, ACx-де күшті реакцияларды сирек тудыратынын байқадық, ал ксенотрансификацияға тән (мысалы, ән құстары немесе теңіз шошқаларының дауыстары) әдетте бүкіл тон картасын. 36 қолданылған ысқырық 1 с тітіркендіргішке қосылды, 25 рет ұсынылды).
Біз сондай-ақ сіздің талаптарыңызға сәйкес rf пассивті компоненттерін теңшей аламыз. Қажетті сипаттамаларды беру үшін теңшеу бетіне кіруге болады.
https://www.keenlion.com/customization/
Эмали:
sales@keenlion.com
tom@keenlion.com
Жіберу уақыты: 23 маусым-2022 ж
